当灭菌后培养料温度降到30℃以下时，接种要在无菌环境中进行，可在接种室箱、接种室、或超净工作台内接种，用接种钩、接种铲，二人合作，手用75%酒精棉球擦拭消毒，菌种用新培养好的无杂菌原种，点燃酒精灯，一人用烧灼的接种钩钩取一小块原种，另一人拔掉袋口棉塞，方入原种后，迅速塞好棉塞，每瓶原种可接30―40个塑料袋。